質(zhì)譜儀常見(jiàn)問(wèn)題有哪些

對于島津、安捷倫、Sciex等常見(jiàn)品牌的二手氣質(zhì)聯(lián)用儀，二手液質(zhì)聯(lián)用儀等，我們來(lái)詳細談?wù)勱P(guān)于質(zhì)譜儀常見(jiàn)問(wèn)題及使用經(jīng)驗，希望能夠對您有所幫助。

質(zhì)譜儀常見(jiàn)問(wèn)題匯總

1、質(zhì)譜不出峰的可能原因？

答：1）進(jìn)樣系統與離子源沒(méi)連接或有漏液

       2）六通閥漏液

       3）霧化氣沒(méi)開(kāi)

       4）噴霧電壓沒(méi)有

       5）離子進(jìn)入分析器的離子通道堵塞

       6）噴霧毛細管堵塞

2、如何根據樣品選擇離子源？

答：可根據分子量的大小、極性。APCI適合小分子，極性小的化合物；ESI適合分析的分子量范圍較大、分子要求帶有一定極性。一般先考慮用ESI分析，如果極性實(shí)在太小，才想到用APCI。

3、等度還是梯度洗脫如何選擇？

答：其實(shí)只做一兩個(gè)化合物，是等度洗脫好，速度快，但也并非越快越好，特別在分析生物樣品時(shí)，考慮到基質(zhì)效應，保留因子控制在2-3左右較好。梯度洗脫適合分析多個(gè)結構不同的物質(zhì)，如化合物與代謝產(chǎn)物一同鑒定的時(shí)候，比如苷和苷元的一同測定。另外很多做合成化學(xué)的分析實(shí)驗室用的也是一通用的梯度洗脫方法，一個(gè)方法搞定大部分樣品。一般來(lái)說(shuō)對于組成簡(jiǎn)單的樣品可以采用等度洗脫，而對于那些復雜的樣品分離通常需要進(jìn)行梯度洗脫。

4、氣質(zhì)和液質(zhì)系統對比

答：除了采用的分離手段不同（氣相和液相）外主要的區別在于真空系統和電離方式。氣質(zhì)的真空系統比較簡(jiǎn)單，只要一個(gè)小的機械泵和一個(gè)分子渦輪泵就可以了。液質(zhì)的機械泵要比氣質(zhì)大，需要兩個(gè)分子渦輪泵。氣質(zhì)的電離方式有電子電離（EI）和化學(xué)電離（CI）。液質(zhì)的電離方式有電噴霧電離（ESI）、大氣壓化學(xué)電離（APCI）和大氣壓光電離（APPI）。

5、APCI和ESI的不同點(diǎn)？

答：1）離子產(chǎn)生的方式不同。APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。

       2）能被分析的化合物類(lèi)型不同。APCI適合弱極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性；ESI 極性化合物和生物大分子。

      3）流速不同。ESI一般流速較小，約0.001到0.25 mL/min，APCI 相對較大，約0.2到2 mL/min。

      4）多電荷。APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子；ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類(lèi)等生物分子。

6、CID和CAD區別？

答：CID（collision-induced dissociation），碰撞誘導解離。通常在真空接口處調節電壓發(fā)生CID現象，一般是去除溶劑，如果電壓增大，也會(huì )產(chǎn)生碎片離子。這是yi級質(zhì)譜的原理。CAD（collision-activated dissociation） 碰撞活化解離。 做二級質(zhì)譜時(shí)，選擇的母離子進(jìn)入Q2后，碰撞活化產(chǎn)生子離子，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為 CAD。以API3200譜儀為例，CID指的是Q0里面的誘導碰撞的氣體，CAD指的是Q3里面的誘導碰撞氣體。也就是說(shuō)，在這里的CID&CAD都是指氮氣。

7、氮氣發(fā)生器該使用嗎？

答：氮氣發(fā)生器的工作原理是分離空氣，電解膜的負極側發(fā)生氧化反應，“吃掉”空氣中的氧化性氣體，在正極側還原，空氣流過(guò)電解池后就只剩下氮氣和惰性氣體。故國內發(fā)生器的純度大多標有“相對含氧量”。氮氣的純度和空氣流速、有效分解面的長(cháng)度、電解電勢的強弱都有關(guān)系。這種分離方法也決定了氮氣的純度不可能做的很高。加入電解質(zhì)的作用就是提高水的導電率，使電化學(xué)反應能順利進(jìn)行。發(fā)生器對質(zhì)譜的影響有一點(diǎn)常常被忽略，就是發(fā)生器內的開(kāi)關(guān)電源工作時(shí)會(huì )對電網(wǎng)電壓造成一定的干擾（壓縮機的啟動(dòng)和停止也會(huì )）。

8、串聯(lián)質(zhì)譜如何定量？

答：串聯(lián)質(zhì)譜定量時(shí)，是以后面產(chǎn)生的碎片峰（子離子）定量。但是這一子離子是由母離子在碰撞室產(chǎn)生的特征性碎片，所以用MRM定量靈敏度會(huì )比用SIM定量好很多。建立方法的步驟是：用一定溶度的標準品溶液（1-10 ug/mL）調諧化合物的yi級質(zhì)譜條件，找到母離子的更佳質(zhì)譜條件。然后對母離子進(jìn)行打碎，優(yōu)化碰撞能量，得到其特征性的子離子。更后利用該質(zhì)譜條件和該母離子->子離子對進(jìn)行定量。

9、質(zhì)量偏差怎么辦？

答：質(zhì)譜的質(zhì)量數偏了，說(shuō)明你的儀器該校正了，一般3個(gè)月就要校一次機。一般每個(gè)廠(chǎng)家都會(huì )隨機帶有校正液。

10、如何更換機械泵油？

答：一般3個(gè)月到半年更換一次泵油，可同時(shí)停機對儀器進(jìn)行一次清洗。更換泵油的時(shí)候，先開(kāi)啟振氣閥5-10分鐘，待將泵內沉淀振起后，關(guān)閉振氣閥，同時(shí)關(guān)閉電源。打開(kāi)泵下的泵油排放閥門(mén)，放掉舊油。如果泵油已經(jīng)很臟，則可取少許新油清洗泵后放掉再注入新油。

11、產(chǎn)生碰裝室離子交互影響（Collision Cell Cross Talk）的原因及消除？

答：多通道掃描（MRM）時(shí)，如果兩個(gè)離子掃描通道的碎片離子一樣（或類(lèi)似如相差1-2分子量單位），前一個(gè)離子通道掃描結束后，碰裝室里的離子來(lái)不及清除，影響下一個(gè)離子通道反應的定量（如果色譜分離完全則無(wú)此影響）。

可能的消除方法：

1）選擇特異的子離子（特別是在用穩定同位素內標時(shí)）

2）增加離子通道掃描反應之間的時(shí)間間隔（如100 ms→300 ms）

3）可設置額外的“無(wú)用的離子掃描通道（dummy MRM）”

12、排除色譜柱流失問(wèn)題的更佳方法是什么？

答：診斷色譜柱是否存在流失問(wèn)題的方法是第yi次在方法條件下安裝色譜柱時(shí)，做一次空白色譜圖，然后將近期的運行和空白運行色譜圖對比。如果在空白運行中產(chǎn)生了很多峰，則色譜柱性能改變，這可能是由于載氣中含有氧氣，也可能是由于樣品殘留。如果有 GC-MS，則低極性色譜柱的典型流失離子（例如 DB/HP-1或5）質(zhì)/荷比m/z 將為 207、73、281、355 等，大多數為環(huán)硅氧烷。

13、譜圖為什么只有溶劑峰？

答：可能有以下原因

1）進(jìn)樣針損壞

2）載氣流速太低

3）樣品濃度太低

4）樣品被柱或進(jìn)樣器襯套吸附

14、質(zhì)譜基線(xiàn)高是什么原因？

答：質(zhì)譜的基線(xiàn)其實(shí)跟液相的紫外檢測器和熒光檢測器一樣，基線(xiàn)高的原因不外乎內部和外部的原因。

1）選擇的流動(dòng)相在質(zhì)譜的響應比較高，比如水相比較多的時(shí)候，噪音比較大些；還有如果鹽含量比較大的時(shí)候，噪音更大些。

2）檢測器的靈敏度越高的時(shí)候，噪音應該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴重時(shí)，基線(xiàn)肯定比較高。比如離子阱檢測器，用得久了，阱中的離子就會(huì )增多，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度，另一方面增加了基線(xiàn)噪音。

3）質(zhì)譜的基線(xiàn)很多時(shí)候還跟你選擇的離子寬度有關(guān)。比如作選擇離子掃描的時(shí)候，基線(xiàn)就低些。作選擇反應掃描的時(shí)候，離子寬度不要選得太寬，太寬噪音就高些。

4）多級質(zhì)譜一般做二級或三級質(zhì)譜，基線(xiàn)噪音就低很多。

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  質(zhì)譜儀相關(guān)的使用經(jīng)驗

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  總結HPLC校正因子法在中藥雜質(zhì)定量方面應用的問(wèn)題